公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號(hào) |
結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW1116 | 貼壁生長 | EY-X63922 |
細(xì)胞名稱 結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW1116
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: CSAp陰性(CSAp-);結(jié)腸抗原3,陰性;角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性;癌基因c-myc,K-ras,H-ras,myb,sis和fos的表達(dá)呈陽性;未檢測到癌基因N-myc和N-ras的表達(dá)。表達(dá)腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白CC-4,CC-5和CC-6。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(41+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因B檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人胃癌細(xì)胞;HGC27-mCherry-2形態(tài)特性: 上皮樣MHC Class-I chain related gene B
µ型阿片受體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8-mCherry形態(tài)特性: 上皮樣Mu-type opioid receptor
類免疫缺陷病2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8-tdT形態(tài)特性: 上皮樣Immunodeficiency virus
Ia檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8-Luc2-tdT形態(tài)特性: 上皮樣coagulation factorIa
拓?fù)洚悩?gòu)酶10檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 綠色熒光蛋白標(biāo)記的人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8-EGFP形態(tài)特性: 上皮樣Topoisomerase 10
金黃色葡萄球菌腸素D檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人癌細(xì)胞;MDA-MB-231-tdT形態(tài)特性: 上皮樣Staphylococcal EnterotoxinD
乙二醛酶Ⅰ檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人癌細(xì)胞;MDA-MB-231-mCherry形態(tài)特性: 上皮樣GlyoxalaseⅠ
甲狀腺激素反應(yīng)基因檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 綠色熒光蛋白標(biāo)記的人癌細(xì)胞;MDA-MB-231-EGFP形態(tài)特性: 上皮樣Thyroid Hormone Responsive
Tolloid樣蛋白1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人癌細(xì)胞;MDA-MB-231-Luc2-tdT形態(tài)特性: 上皮樣Tolloid Like Protein 1
腫瘤調(diào)節(jié)蛋白1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 綠色熒光蛋白標(biāo)記的人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP形態(tài)特性: 上皮樣Tomoregulin 1
腫瘤調(diào)節(jié)蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9C2(2-1)-mCherry形態(tài)特性: 成肌細(xì)胞Tomoregulin
硬纖毛蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9C2(2-1)-tdT形態(tài)特性: 成肌細(xì)胞Stereocilin
固醇類生成因子1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9C2(2-1)-Luc2-tdT形態(tài)特性: 成肌細(xì)胞SF1
Ⅺa檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 綠色熒光蛋白標(biāo)記的人結(jié)腸癌細(xì)胞;HCT116-EGFP形態(tài)特性: 上皮樣coagulation factor Ⅺa
IXa檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠逆轉(zhuǎn)錄病包裝細(xì)胞;PT-67形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣coagulation factor IXa
XIIIa檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383形態(tài)特性: 巨噬細(xì)胞樣coagulation factor XIIIa
趨化因子C-C-基元受體5檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;C3H10T1/2clone8形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Chemokine C-C-Motif Receptor 5
結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW1116沒食子兒茶素3371-27-5中文別名:棓兒茶; 沒食子酰兒茶素
英文名:GC; (-)-gallocatechin
CAS登錄號(hào):3371-27-5
分子式:C15H14O7
分子量:306.27
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色結(jié)晶粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源:綠茶
熔點(diǎn):240-241℃
旋光度:-14.049(c 0.001,)
藥理藥效:茶素類物質(zhì)具有清除自由基、抑制腫瘤、抗誘變、抗病、降脂助消化、護(hù)膚美容等多種生物活性。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。