產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
停乳鏈球菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Streptococcus dysgalactiae | EY00P9383 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
5-甲基蜂蜜曲霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)鎂試劑Ⅰ ARHuman LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit
安五脂素(標(biāo)準(zhǔn)品)鎂試劑Ⅱ ARHuman PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit
槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龍膽雙糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)甲基紫 ARHuman KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit
絡(luò)石苷(標(biāo)準(zhǔn)品)甲基紫 IND(pH 0.1-2.0)Human HSD17B10(3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase type-2) ELISA Kit
竹節(jié)參皂苷IVa(標(biāo)準(zhǔn)品)1-亞硝基-2-萘酚 96%Human RAB10(Ras-related protein Rab-10) ELISA Kit
毛蘭素(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃G BSHuman LILRB4(Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 4) ELISA Kit
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃G AR,≥80.0% (HPLC)Human PPP1R14B(Protein phosphatase 1 regulatory subunit 14B) ELISA Kit
洋艾素(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃G AR,≥80.0% (HPLC)Human LPPR4(Lipid phosphate phosphatase-related protein type 4) ELISA Kit
α-常春藤皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃G ≥96%(HPLC)Human NBR1(Next to BRCA1 gene 1 protein) ELISA Kit
款冬酮(標(biāo)準(zhǔn)品)油紅O Biological stainHuman TTF2(Transcription termination factor 2) ELISA Kit
太子參環(huán)肽B(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃Ⅳ IndicatorHuman TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) ELISA Kit
紫萁酮(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃Ⅰ Biological stainHuman KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) ELISA Kit
α-三聯(lián)噻吩(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃Ⅰ IndicatorHuman TBX21(T-box transcription factor TBX21) ELISA Kit
耐斯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃Ⅱ Dye content >85%Human DKKL1(Dickkopf-like protein 1) ELISA Kit
對(duì)羥基苯乙酮(標(biāo)準(zhǔn)品)橙黃II Biological stainHuman C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) ELISA Kit
停乳鏈球菌探針法PCR熒光定量試劑盒細(xì)胞周期素M4(CCNM4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴甲酚綠 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞周期素M1(CCNM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴百里香酚藍(lán) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
細(xì)胞周期素M2(CCNM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴甲酚紫 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
細(xì)胞周期素M3(CCNM3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴甲酚紫(98%) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
氨肽酶O(APO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)溴甲酚紫(98%) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
鈣蛋白酶8(CAPN8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鉍試劑Ⅱ(CP) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
封閉蛋白10(CLDN10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鉍試劑Ⅱ(98%) 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
封閉蛋白15(CLDN15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鉍試劑Ⅱ(98%) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定