如何完善Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失?
Elisa試劑盒操作步驟多,新手操作難免會(huì)有過失。而這些過失很多是由細(xì)節(jié)不夠好造成的,減少過失的方法有很多,比如做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說話,防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會(huì)自己發(fā)掘問題,找出原因。那么我們要如何完善ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失?
一:評(píng)估試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),判定試劑符合要求后方可使用。
二:操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn),比如洗板次數(shù)的掌握等。
三:加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結(jié)果。另外,顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長(zhǎng)時(shí)間暴露在外,尤其室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效。
四:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
五:使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要
六:嚴(yán)格掌握Elisa試劑盒顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,不可報(bào)陽(yáng)性,這可能是本底顯色的結(jié)果。
Sennidin B 番瀉苷元B 番瀉甙元B 517-44-2 HPLC≥98% 20mg/支
Sinensetin 甜橙黃酮 5,6,7,3',4'-五甲氧基黃酮 2306-27-6 HPLC≥98% 20mg/支
Spinosin 斯皮諾素 棘苷 72063-39-9 HPLC≥98% 20mg/支
Pedunculoside 具棲冬青苷 長(zhǎng)梗冬青苷; 具棲冬青甙; 長(zhǎng)梗冬青甙 42719-32-4 HPLC≥98% 20mg/支
Zingerone 姜酮 122-48-5 HPLC≥98% 20mg/支
α-Cyperone α-香附酮 473-08-5 HPLC≥98% 20mg/支
Sanggenone D 桑根酮D 81422-93-7 HPLC≥98% 20mg/支
Forsythoside A 連翹酯苷A 連翹酯素 79916-77-1 HPLC≥98% 20mg/支
5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol 千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 218916-52-0 HPLC≥98% 20mg/支
Elisa試劑盒